Температура, при которой должен работать ротовап, обычно составляет около 50°C, особенно если он используется в сочетании с глубоким вакуумом. Этот температурный режим имеет решающее значение для эффективного испарения без повреждения образца, особенно при работе с такими деликатными компонентами, как пептиды или белки.
Объяснение температурного режима:
Выбор температуры 50°C имеет стратегическое значение, поскольку позволяет сбалансировать потребность в достаточном количестве тепла для облегчения испарения и предотвратить перегрев чувствительных материалов. В глубоком вакууме температура кипения растворителей значительно снижается, что позволяет им испаряться при более низких температурах, чем при обычном атмосферном давлении. Это особенно важно, когда образец содержит хрупкие биологические молекулы, которые могут денатурировать или разрушаться при более высоких температурах.Роль вакуума:
- Глубокий вакуум необходим для понижения температуры кипения растворителей, что, в свою очередь, позволяет работать при более низких температурах. Традиционные источники вакуума, такие как перистальтические насосы или аспираторы, недостаточны для этой цели, поскольку они не могут достичь низких давлений (в диапазоне мТорр), необходимых для эффективной работы ротовапа. Поэтому рекомендуется использовать надежный вакуумный насос, способный достигать таких низких давлений.Операционные шаги:
- Запуск вакуумного насоса: Прежде чем вводить образец, запустите вакуумный насос и дайте ему потянуть вниз в течение нескольких минут. Эта начальная установка вакуума гарантирует, что система готова к работе.
- Запустите ротовап: Как только вакуум станет стабильным и покажет низкие показания, введите небольшой объем (20% от общего объема) жидкости в клапан ротовапа. Процесс испарения начнется, когда температура охладителя немного повысится.
Отрегулируйте впрыск: Следите за температурой; как только она стабилизируется или начнет снижаться, медленно откройте клапан впрыска, чтобы ввести больше жидкости в ротационную колбу. Цель состоит в том, чтобы согласовать скорости ввода и вывода для поддержания стабильного процесса.
Заключение:
