Какова температура автоклава в микробиологической лаборатории? Достижение стерильных условий при 121°C

Для большинства микробиологических применений стандартная температура автоклавирования составляет 121°C (250°F). Эта температура достигается и поддерживается с помощью насыщенного пара под давлением примерно 15 фунтов на квадратный дюйм (psi) выше атмосферного давления. Минимальное время воздействия при этой температуре обычно составляет 15 минут.

Ключом к эффективной стерилизации является не только температура, но и сочетание температуры, времени и прямого контакта с паром под давлением. Это трио необходимо для надежного уничтожения всех форм микробной жизни, включая самые устойчивые бактериальные споры.

Почему 121°C — золотой стандарт

Выбор 121°C не случаен. Это научно обоснованный эталон, разработанный для гарантии полного уничтожения микроорганизмов при таких применениях, как приготовление культуральных сред и обеззараживание отходов.

Сила насыщенного пара

Сухое тепло плохо проводит тепловую энергию. Насыщенный пар, однако, исключительно эффективен в передаче тепла.

Под давлением пар конденсируется на более холодных поверхностях, быстро передавая большое количество энергии, которая денатурирует важные белки и расплавляет липиды в микробных клетках, вызывая их гибель.

Цель — самый стойкий противник: бактериальные споры

Основной целью стерилизации являются бактериальные эндоспоры, например, из родов Geobacillus и Clostridium. Это покоящиеся, высокоустойчивые структуры, которые могут выживать при кипячении и воздействии многих химических дезинфицирующих средств.

Температура 121°C доказанно надежно уничтожает даже самые термостойкие споры в течение практического периода времени, обеспечивая истинную стерильность. Если ваш процесс может убить эти споры, он считается эффективным против всех других микробов.

Критическая роль давления

В открытой среде вода кипит при 100°C (212°F) — температуры, недостаточной для быстрого уничтожения бактериальных спор.

Давление внутри автоклава (обычно 15 фунтов на квадратный дюйм) служит одной основной цели: повысить температуру кипения воды до 121°C. Само по себе давление оказывает минимальное убивающее действие; оно является фактором, обеспечивающим высокую температуру.

Фактор помимо температуры: время

Достижение 121°C — это только половина дела. Продолжительность цикла одинаково важна и сильно зависит от стерилизуемых предметов.

Объяснение "правила 15 минут"

Стандартный 15-минутный цикл относится ко времени, в течение которого вся загрузка выдерживается при 121°C. Это не включает время, необходимое для нагрева или охлаждения автоклава.

Эта продолжительность, как правило, достаточна для стерилизации твердых, непористых предметов, таких как стеклянная посуда или металлические инструменты, которые обеспечивают быстрое проникновение пара.

Почему тип загрузки определяет время цикла

Наиболее частая причина сбоев при автоклавировании — недостаточное время цикла для конкретной загрузки. Пар должен проникать в самый центр загрузки, чтобы быть эффективным.

Большие объемы жидкости, плотные материалы (например, пакеты для биологически опасных отходов) или плотно упакованные хирургические наборы требуют значительно более длительных циклов. Например, колба с 2 литрами среды может потребовать 30 минут или более при 121°C, чтобы жидкость в центре достигла целевой температуры.

Распространенные ошибки, которых следует избегать

Успешная стерилизация зависит от правильной техники. Избегание этих распространенных ошибок необходимо для обеспечения безопасности и целостности вашей работы.

Неправильная загрузка

Никогда не перегружайте автоклав. Предметы должны быть загружены свободно, чтобы пар мог свободно циркулировать вокруг и внутри каждого объекта. Оставление пространства между предметами критически важно для эффективной стерилизации.

Использование герметичных контейнеров

Автоклавирование плотно закрытой бутылки или контейнера крайне опасно и может вызвать взрыв. Всегда используйте вентилируемые крышки или убедитесь, что крышки ослаблены, чтобы давление могло выравниваться. Стеклянная посуда должна быть изготовлена из боросиликатного стекла (Pyrex или Kimax), которое может выдерживать изменения температуры.

Игнорирование контроля качества

Визуального подтверждения недостаточно. Стерилизация должна быть подтверждена.

• Автоклавная лента имеет полоски, которые меняют цвет при воздействии тепла, но это лишь подтверждает, что камера достигла температуры, а не то, что загрузка стерильна.
• Биологические индикаторы, содержащие термостойкие споры, такие как Geobacillus stearothermophilus, являются золотым стандартом. Если споры уничтожены после цикла, вы подтвердили истинную стерилизацию.

Как применить это к вашему проекту

Правильные параметры цикла полностью зависят от вашей цели. Используйте эти рекомендации в качестве отправной точки для разработки ваших конкретных лабораторных протоколов.

• Если ваша основная цель — стерилизация чистых инструментов или стеклянной посуды: Стандартный 15-20-минутный цикл при 121°C после правильной загрузки, как правило, эффективен.
• Если ваша основная цель — приготовление жидких культуральных сред: Увеличьте время цикла в зависимости от объема — колба на 1 литр может потребовать 30 минут, в то время как колба на 4 литра может потребовать час или более.
• Если ваша основная цель — обеззараживание биологически опасных отходов: Используйте более длительные циклы (45-60 минут) и добавьте небольшое количество воды в автоклавный пакет для создания достаточного количества пара для проникновения в плотные материалы.

Освоение этих основных принципов паровой стерилизации является фундаментальным для обеспечения безопасности вашей лаборатории и достоверности ваших экспериментальных результатов.

Сводная таблица:

Параметр	Стандартное значение	Ключевое назначение
Температура	121°C (250°F)	Уничтожает всю микробную жизнь, включая споры
Давление	15 psi (выше атмосферного)	Повышает температуру кипения воды до 121°C
Минимальное время	15 минут (при температуре)	Обеспечивает проникновение пара во всю загрузку

Обеспечьте стерильность и безопасность вашей лаборатории с помощью правильного оборудования.

KINTEK специализируется на высокопроизводительных автоклавах и лабораторном оборудовании, разработанном для удовлетворения строгих требований микробиологии. Наши решения обеспечивают надежный контроль температуры и стабильные результаты для стерилизации сред, стеклянной посуды и биологически опасных отходов.

Свяжитесь с нашими экспертами сегодня, чтобы найти идеальный автоклав для нужд вашей лаборатории и добиться гарантированной стерилизации.

Визуальное руководство